实验室器皿如何选用、洗涤、消毒?
1、器皿的选用
分析检验时离不开各种器皿,所需的各种器皿应根据检验方法的要求来选用。一般应选用硬质的玻璃器皿;有些试剂对玻璃有腐蚀性(如NaOH等),需选聚乙烯瓶贮存;遇光不稳定的试剂(如AgNO3 /I2等)应选择棕色玻璃瓶避光贮存。选用时还应考虑到容量及容量精度和加热的要求等。
2、器皿的洗涤
1)玻璃器皿的洗涤
(a)浸泡
新瓶使用前应先用自来水简单刷洗,然后用稀盐酸溶液(5%)浸泡过夜;培养后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中;注意:让水能完全进入瓶皿中,不应留有气泡.
(b)刷洗
浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂洗涤(宜选用软毛刷和优质的洗涤剂,如高级洗衣粉或洗洁精),绝对不能使用含沙粒的去污粉!洗刷时特别注意洗刷瓶角部位.
(c)浸泡
器皿要充满清洁液,勿留气泡.浸泡时间不应少于6小时;一般应浸泡过夜.
清洗液配方:
【强液】 重铬酸钾 63g
浓硫酸 1000ml
蒸馏水 200L
【次强液】 重铬酸钾 120g
浓硫酸 200ml
蒸馏水 1000ml
【弱液】 重铬酸钾 100g
浓硫酸 100ml
蒸馏水 100ml
矽酸钠洗液;
使用比较安全,可以代替清洗液,但价格较贵.
先配制成100Χ贮存液:矽酸钾80g,偏磷酸钠9g,加热溶解在1000ml蒸馏水中.使用时,用蒸馏水100倍稀释.
(d)冲洗
刷洗和浸酸后都必须用水充分冲洗,使之不留任何残迹.冲洗宜用洗涤装置,以保证冲洗效果,如用手工操作,每瓶都得用水灌满,倒掉,重复十次以上,最后再用蒸馏水漂洗2~3次,凉干备用.
2)胶塞的清洗
新购置的胶塞先用自来水冲洗干净后,再做常规处理.
常规洗涤方法:
浸泡
↓
2%NaOH煮沸(10~20分钟)
↓
自来水冲洗
↓
1%稀盐酸浸泡(30分钟)
↓
自来水冲洗
↓
蒸馏水清洗(2~3次)
↓
晾干备用
3)塑料器皿的清洗
目前我国培养使用的塑料器皿主要是从国外购置的,是一种无毒并已经消毒过灭菌密封包装的商品.用时,只要打开包装即可,是一次使用性物品.必要时,用后经无菌处理后,尚可反复使用2~3次,但不宜过多.再用时仍然需要清洗和灭菌处理.塑料器皿质地软,不宜用毛刷刷洗,造成清洗困难.为此使用中一是防止划痕,二是用后要立即浸入水中,严防附着物干结;如残留有附着物,可用脱脂棉清拭掉,用流水冲洗干净,凉干、再用2%NaOH液浸泡过夜,用自来水充分冲洗,然后 用5%盐酸溶液浸泡30分钟,最后用自来水冲洗和蒸馏水漂洗干净,凉干后备用.
常用洗涤液的配制:
①肥皂水、洗衣粉水、去污粉水:根据洗涤的情况具体配制。
②王水:3份HCL与1份HNO3混合
③HCL洗液(1+3):1份HCL与3份水混合。
④铬酸洗液:称取50gK2CrO7,加170~180ml水,加热溶解成饱和溶液,在搅拌下徐徐加入浓H2SO4至约500ml。
⑤碱性酒精洗液:用体积分数为95%的乙醇与质量分数为30%的NaOH溶液等体积混合。
3、器皿的消毒
a)紫外线消毒
紫外线直接照射法很方便,效果好,是目前各实验室常用的消毒法.
【适用范围】空气、操作台表面和一些不能使用其它方法进行消毒的培养器皿(如塑料培养皿、培养板等)
【要求】(1)培养室的紫外线灯应距地面2.5米,使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射,才能发生有效的消毒作用.(2)由于各种细菌对紫外线的敏感性不同,所用照射时间和剂量也不同.
【缺点】(1)产生臭氧,污染空气,对身体有害;(2)射线照射不到的部位起不到消毒作用,故消毒时,物品不宜相互遮挡.
【注意】 有人习惯于边照射边进行实验操作,这样不好,一是紫外线对细胞、试剂和培养液都有不良影响,二是对人体皮肤也有伤害.
b)湿热消毒
湿热消毒即高压蒸汽消毒,是最有效的一种方法.
【适用范围】布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿及某些培养用液.
【要求】
培养用液、橡胶制品 10磅10分钟
布类、玻璃制品、金属器械等 15磅20分钟
c)滤过消毒
【适用范围】 大多数培养用液,如人工合成培养液、血清、酶溶液等(这些在高温下会发生变性,失去其功能,必须采用滤过法除菌.
【常用滤器】Zeiss滤器、微孔滤膜滤器及各种不同规格的一次性滤器.常用孔径0.22um滤膜过滤一般用液即可.
【注意】
(1)滤膜用后丢弃,滤器清洗也比较方便,先用毛刷蘸洗涤剂刷洗干净,用自来水冲洗后,再用蒸馏水冲洗,凉干即可;
(2)用前再装上一张新的滤膜;
(3)消毒时旋钮不要扭太紧,凡与空气接触部位都用纸包装好,以保证消毒时的效果;
(4)消毒后,在无菌环境中立即将旋钮扭紧;
(5)滤过少量液体时,用一种能安装在注射器上的小滤器,使用相同的滤膜,滤过时把滤过物装入注射器针管内,压出过滤物注入无菌容器中即.
4、仪器、设备的要求:
①玻璃量器的要求:检验方法中所使用的滴定管、移液管、容量瓶、刻度吸管、比色管等玻璃量器均须按国家有关规定及规程进行校准或检定。玻璃量器和玻璃器皿须经彻底洗净后才能使用。
②控温设备的要求:检验方法中所使用的恒温干燥箱、恒温水浴锅等均须按国家有关规程进行测试和校准或检定。
③测量仪器的要求:天平、酸度计、温度计、分光光度计、色谱仪等均应按国家有关规定及规程进行校准或检定。
注:检验方法中所列仪器为该方法所需要的主要仪器,一般实验室常用仪器不再列入。
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